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苯酚硫酸法怎么操作？苯酚硫酸法注意事項有哪些？

來源：今日熱點 時間：2023-06-25 15:56:14

苯酚硫酸法怎么操作?

1.制作標準曲線：準確稱取標準葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸餾水補至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻靜置30分鐘以后于490nm測吸光度，以2.0ml水按同樣顯色操作為空白，橫坐標為多糖微克數，縱坐標為光密度值，得標準曲線。

2. 取多糖樣品1.0ml，加1.0ml蒸餾水，然后加入6%苯酚1.0ml，迅速加入濃硫酸5.0ml，在渦旋儀上震蕩，充分混勻，靜置30分鐘，于490nm測定吸光度，并將測得的吸光度帶入標準曲線中，可獲得多糖濃度。

苯酚硫酸法注意事項有哪些?

(1)此法簡單、快速、靈敏、重復性好，對每種糖僅制作一條標準曲線，顏色持久。

(2)制作標準線宜用相應的標準多糖，如用葡萄糖，應以校正系數0.9校正μg數。

(3)對雜多糖，分析結果可根據各單糖的組成比及主要組分單糖的標準曲線的校正系數加以校正計算。

(4)測定時根據光密度值確定取樣的量。光密度值最好在0.1——0.3之間。比如：小于0.1之下可以考慮取樣品時取2克，仍取0.2ml樣品液，如大于0.3可以減半取0.1ml的樣品液測定。

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標簽： 苯酚硫酸法怎么操作 苯酚硫酸法注意事

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