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southern雜交指的是什么？ 瓊脂糖凝膠電泳分離待測DNA樣品基本原理是什么？|天天熱訊

來源：今日熱點 時間：2023-06-25 13:45:34

southern雜交指的是什么？

Southern印跡雜交（Southern blot）是1975年由英國人southern創建，是研究DNA圖譜的基本技術，在遺傳病診斷、DNA圖譜分析及PCR產物分析等方面有重要價值。由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性，綜合凝膠電泳和核酸內切限制酶分析的結果，便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進一步構建出DNA分子的遺傳圖，或進行目的基因序列的測定以滿足基因克隆的特殊要求，還必須掌握DNA分子中基因編碼區的大小和位置。有關這類數據資料可應用Southern印跡雜交技術獲得。

瓊脂糖凝膠電泳分離待測DNA樣品基本原理是什么？

Southern印跡雜交是先將DNA樣品（含不同大小的DNA片段）先按片段長短進行分離，然后進行雜交。這樣可確定雜交靶分子的大小。因此，制備DNA樣品后需要進行電泳分離。在恒定電壓下，將DNA樣品放在0.8～1.0%瓊脂糖凝膠中進行電泳，標準的瓊脂糖凝膠電泳可分辨70－80000bp的DNA片段，故可對DNA片段進行分離。但需要用不同的膠濃度來分辨這個范圍內的不同的DNA片段。原則是分辨大片段的DNA需要用濃度較低的膠，分辨小片段的DNA則需要濃度較高的膠。經過一段時間電泳后，DNA按分子量大小在凝膠中形成許多條帶，大小相同的分子處于同一條帶位置。另外為了便于測定待測DNA分子量的大小或是所處的分子大小范圍，往往同時在樣品鄰近的泳道中加入已知分子量的DNA樣品即標準分子量DNA （DNA marker）進行電泳。DNA marker可以用放射性核素進行末端標記，通過這種方式，雜交后的標準分子量DNA也能顯影出條帶。

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標簽： southern雜交指的是什么瓊脂糖凝膠電泳

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